СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ КОМПЛЕКСА СУПЕРОКСИДДИСМУТАЗЫ И КАТАЛАЗЫ ИЗ ЭРИТРОЦИТОВ КРОВИ ЧЕЛОВЕКА
Изобретение относится к медицинской биохимии, в частности к энзимологии. Целью изобретения является интенсификация способа. Поставленная цель достигается тем, что эритроциты крови человека отмывают физиологическим раствором, центрифугируют при 2500 g в течение 15 мин, лизируют эритроциты равным объемом дистиллированной воды в течение 4 ч при температуре -4°С.
В лизат добавляют 0,3 - 0,5% мочевины по объему. Затем лизат эритроцитов обрабатывают смесью хлороформа и этанола в соотношении лизат - хлороформ - этанол 1 : 0,15 : 0,25 в течение 40 - 60 мин. Центрифугируют, удаляют осадок. К надосадочной жидкости добавляют 0, 1 н. раствор соляной кислоты до рН 3,7 - 4,2. Осадок выдерживают 10 - 12 ч, повторно центрифугируют. К полученной надосадочной жидкости добавляют ацетон в соотношении 1 : 1 при температуре -4°С. Далее повторно центрифугируют, осадок растворяют в фосфатном буфере с рН 7,4 - 7,8, проводят диализ против фосфатного буфера с последующей стерилизующей фильтрацией целевого продукта. Целевой продукт содержит 1 фракцию каталазы и 2 фракции супероксиддисмутазы. Электроферетическая чистота 99%, содержание супероксиддисмутазы 33,3%, каталазы 66,6%, примесей 0,1%. Предложенный способ позволяет сократить время получения целевого продукта по сравнению со способом-прототипом с 50 - 56 до 26 - 36 ч.
Описание документа
Портал НЭБ предлагает вам прочитать онлайн или скачать патент «СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ КОМПЛЕКСА СУПЕРОКСИДДИСМУТАЗЫ И КАТАЛАЗЫ ИЗ ЭРИТРОЦИТОВ КРОВИ ЧЕЛОВЕКА», заявителя Свечникова Л.В., Благородов С.Г., Шепелев А.П., Сазыкина О.В., Дмитриева Н.А., Кесельман Э.В., Межова И.В. , патентообладателя «Научно-производственное объединение "Биопрепарат" ». Содержит 3 ст. Язык: «Русский».
Выражаем благодарность библиотеке «Федеральный институт промышленной собственности, отделение ВПТБ» за предоставленный материал.