Использование: биотехнология, генная белковая инженерия. Сущность изобретения: способ получения человеческого интерлейкина-3 основан на использовании новой рекомбинантной плазмидной ДНК p3PTEIL3, в которой искусственный ген человеческого интерлейкина-3 находится под контролем тандема трех промоторов (P8, Ptac и Pt7), и его экспрессия происходит после индукции изопропилтиогалактозидом, и штамма-продуцента E.
coli ВКПМ В-6968, обеспечивающего высокий уровень биосинтеза целевого белка (до 30% тотального клеточного белка). Рекомбинантная плазмида содержит тандем промоторов P8, PtaC и Pt7, два Lac-оператора, усилитель трансляции гена 10 фага T7, терминатор транскрипции фага fd, ген β-лактамазы и искусственный ген человеческого интерлейкина-3. Штамм Escherichia coli ВКПМ В-6568 получают путем трансформации компетентных клеток E. coli BL21 (DE3) ekfpvbljq p3PTEIL3. Штамм Escherichia coli ВКПМ В-6968 культивируют в богатой среде, выращенные клетки разрушают в буферном растворе и выделяют рекомбинантный человеческий интерлейкин-3 из телец включения, и затем ренатурируют его известным способом. 3 с.п. ф-лы, 3 ил.
Портал НЭБ предлагает вам прочитать онлайн или скачать патент «СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ РЕКОМБИНАНТНОГО ИНТЕРЛЕЙКИНА-3 ЧЕЛОВЕКА, РЕКОМБИНАНТНАЯ ПЛАЗМИДНАЯ ДНК P3PTEIL3, КОДИРУЮЩАЯ РЕКОМБИНАНТНЫЙ ИНТЕРЛЕЙКИН-3 ЧЕЛОВЕКА, ШТАММ БАКТЕРИЙ ESCHERICHIA COLI - ПРОДУЦЕНТ РЕКОМБИНАНТНОГО ИНТЕРЛЕЙКИНА-3 ЧЕЛОВЕКА», заявителя Гуревич А.И., Качалина Т.А., Мирошников А.И., Свердлов Е.Д., Ажикина Т.Л., Ростапшов В.М., Есипов Р.С., Вульфсон А.Н., Тихонов Р.В., Костромина Т.И. , патентообладателя «Институт биоорганической химии им.М.М.Шемякина и Ю.А.Овчинникова РАН ». Содержит 9 ст. Язык: «Русский».
Выражаем благодарность библиотеке «Федеральный институт промышленной собственности, отделение ВПТБ» за предоставленный материал.